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第1060章 颠覆性发现!神经免疫学领域将变天!

    直接在尾静脉注射fitc-右旋糖酐标记血管、注射罗丹明b标记细胞外间隙就行了。
    没什么技术含量,研究生都能轻松驾驭。
    “接下来,需要监测四项指标。”许秋说道。
    其一,血脑屏障完整性。
    这个很简单,直接用双光子实时成像血管渗漏就行。
    第二,紧密连接蛋白udin-5。
    udin-5是神经功能的守门人,从某种方面来说,血脑屏障的完整性与它有着密不可分的关系。
    可以说,这个实验的重要指标,基本上都是靠udin-5验证的。
    而检测udin-5本身,则是主要是靠免疫组化+westernblot(脑微血管)。
    随后,是小胶质细胞活化,在皮层进行iba-1免疫荧光。
    最后则是血清血脑屏障修复机制,利用气相色谱-质谱来判断,其涉及到了丁酸、乙酸的浓度,以及至关重要的udin-5基因敲除!
    “这个方案……也做出了很多优化啊。”莫雷蒂有些愕然。
    赖光圳等人也不禁点头,目中有着钦佩之色。
    许秋的方法,和常规法子比起来,优势大上不少。
    比如检验血脑屏障的完整性这一点。
    常规手法,是监测分辨菌群的丰度。
    而许秋则改换成了双光子实时成像血管渗漏,优点显而易见,便是可以动态观测血脑屏障修复过程。
    其次,短链脂肪酸修复血脑屏障这一点,许秋对udin-5基因的敲除,堪称妙笔。
    没有了udin-5基因,小鼠的血脑屏障应当会濒临崩溃。
    此时补充短链脂肪酸,若是能够见到血脑屏障渗漏有所改善,则能证明,短链脂肪酸能够修复血脑屏障!
    另外,监测小胶质细胞活化也有着巨大优势。
    常规方法,只会在实验前、实验后查一次神经炎症。
    但,活体小胶质细胞成像却可以实时追踪神经炎症消退。
    这能清晰地反应阿克曼菌、短链脂肪酸等等在抗炎方面发挥的作用!
    很快,各组实验小鼠都依然准备完毕。
    第一件要做的事情,就是确定阿克曼菌已经定值成功,且血清丁酸上升。
    经过检测,实验组的阿克曼菌,翻了将近七百倍。
    而对照组用的是生理盐水,并无明显变化。
    血清丁酸方面,实验组小鼠达到了85个单位,说明血清中丁酸含量已经达到可用的标准。
    随后,是检测血脑修复的证据!
    双光子成像显示,实验组渗漏面积比、与对照比相较而言,减少了百分之七十!
    udin-5表达,westernblot灰度值上升百分之一百五十!
    足足一点五倍。
    这意味着,实验组的血脑屏障非常完整!
    而evans蓝渗出,也仅仅只有3.1μg/g左右,差不多只有对照组的一半不到。
    evans蓝渗出是能直接反映血脑屏障完整性的指标,这无疑进一步确定了短链脂肪酸对血脑屏障的修复作用!
    而最后的神经炎症抑制……
    经检测,iba-1免疫荧光实验组细胞数大约每视场只有28个,而对照则则有足足95个,下降了约百分之七十!
    此外,脑脊液il-6,实验组也远远低于对照组。
    这两个指标,都意味着进行了阿克曼菌定植的实验组,在血脑屏障修复、神经炎症控制方面,都有着碾压一般的优势!
    最终,就是给基因敲除小鼠做实验了。
    按理说,敲除了udin-5基因后,小鼠的血脑屏障会逐步崩溃,神经炎症也会越发严重。
    但,在灌胃丁酸后,小鼠的血脑屏障渗透却得到了明显的改善。
    而且脑脊液il-6也在大幅度下降!
    这两个现象,让在场无数人都振奋不已。
    前者,意味着短链脂肪酸的确可以修复血脑屏障。
    而后者则代表,丁酸盐可独立抗炎!
    “难怪控制得如此迅速!”
    “果然和阿克曼菌分泌的短链脂肪酸有关!”
    “破案了,短链脂肪酸不仅能够修复血脑屏障,同时自身还带有抗炎作用,这等于是又治标又治本!能不快才是怪事!”
    此时,众人都显得尤为兴奋。
    如今已经能够证明,彭月娇突然好转的神经炎症,根源就在于她体内飙升千倍的阿克曼菌!
    那么接下来,就是同样重要的溯源了……
    这突然野蛮生长的阿克曼菌,又是从何而来?
    究竟是不是迷走神经刺激术导致的?
    此刻,众人都有些紧张了。
    如果能证明这一点,那恐怕许秋就要发现一条崭新的、修复血脑屏障的新路了。
    这将会是颠覆性的发现!
    他们很期待,想看看许秋打算怎么证明这一点!
    很快的,许秋
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