最后，通过双光子实时成像采集egfp强度。
而量化指标，胆碱能神经元激活率看egfp和区域荧光强度变化；黏液分泌看tdtomato与囊泡出胞速率……
最终，得出结论：vns组，刺激后十分钟，肠神经丛egfp强度暴涨三倍，意味着胆碱能神经元被vns手术激活。
同时，杯状细胞tdtomato信号爆发，黏液分泌速率提升四倍！
而相比之下，假手术组，则没有这些变化。
阿托品组由于有拮抗剂的存在，上述效应完全被阻断。
至此，足以证明vns通过胆碱能通路促粘液分泌！
“接着就是vns驱动阿克曼菌特异性定植了……”
此时，众人的心里更加紧张。
这是重中之重。
也是决定一切的关键！
如果能证明vns可以增加阿克曼菌，这次的实验，就成功了一大半！
相反，若是得到相反的结果，恐怕之前的所有猜想都没有意义了。
“这次用的是什么小鼠？”
众人看向许秋。
许秋给出了介绍：“人源化菌群小鼠。
“具体来说，是无菌c57b-l/6小鼠灌胃健康人粪便菌液，其中含0.001%阿克曼菌。”
这等于是为此次试验量身定做的小鼠。
若非这里是协和，各种实验动物模型都能找到，可能仅仅是培育，就要数周的时间！
这也就是大平台的优势了。
换做是在临医，恐怕根本没法提供所需的各种实验动物！
许秋即便想要验证，可能也要当场自己选育、培养对应的小鼠，等真正做实验的时候可能已经是数个月之后的事情了。
而除开实验动物，此次所用的菌群追踪技术也尤为关键。
许秋在考察了协和研究所这边拥有的设备后，最终选定了fish时空定位。
探针，选取的是akk-405。
阿克曼菌-16s-rrna-cy5标记探针。
黏液层定位，则是wga-alexa488标记黏蛋白。
相比之下，成像方案就非常简单粗暴了。
直接麻醉下、经钢门插入共聚焦纤维内镜，动态拍摄回肠末端，直接观察菌群。
“这套方案也堪称完美了。”
此时，了解到许秋的具体实验规划后，莫雷蒂等人都啧啧称奇。
实验室普遍的手法，是16s测序。
但，16s测序缺点不少。
它只能反映菌群总量变化、无法区分活菌死菌，而且采样的过程中难免会破坏肠道结构。
这种破坏，对于讲究严格对照实验的科研项目来说，是很严重的不确定性因素。
而许秋选用的fish活体成像，却避开了这三个缺点，甚至将其转化为了优点。
首先，它可以实时观测菌-黏液空间的关系，不再机械式地只能查看菌群总量，而是能综合分析！
此外由于有rrna探针的存在，它能做到知检测活菌，这也是它被称为“fish活体成像”的关键！
最后一点，则是能够无创动态追踪同一部位，可以完美地查看任何区域在任何时候的所有变化！
而在这堪称完美的实验设计之下，结果很快出炉。
最终发现——vns组，红色的阿克曼菌迅速聚集在绿色的黏液层深部。
菌密度达到了足足八倍！
而假手术组，也即对照组，细菌却依旧随机分散于肠腔，没有出现任何菌群的富集现象。
这让众人感到无比振奋！
“在vns的作用下，阿克曼菌真的聚集在一块了！”
“而且短短十几分钟内，菌群密度就已经达到了八倍，若是一个小时、十个小时，恐怕八十倍、八百倍都问题不大！”
菌群的繁殖与生长，呈现指数级生长。
一个变两个，两个变四个……越到后面，数量越爆炸，差距也越大。
当然，真实的人体环境中，不可能存在无限制的暴涨。
彭月娇体内的一千倍，或许就已经是她的肠道环境所能容纳的极限了。
总之，眼下的实验已然证明，vns确实能够特异性地增加阿克曼菌！
“还有最后一点！”
此时，众人都亢奋起来。
这一步，就需要用到基因编辑动物了。
其一是杯状细胞特异性敲除鼠，敲除了肠上皮muc2。
即，剥夺黏液。
这是用来证明，黏液是阿克曼菌增值的必要条件。
其二则是胆碱能神经元激活鼠，即hm3dq-dreadd转基因鼠、注o激活神经元……
很快，实验开始。
首先是剥夺黏液！
针对muc2敲除小鼠，进